Comparação dos meios de preparação e preservação de membrana amniótica humana para uso no tratamento de doenças da superfície ocular / Comparison of the preparation and preservation techniques of amniotic membrane used in the treatment of ocular surface diseases

Resumo Atualmente a membra amniótica (MA) tem obtido importância devido à comprovada capacidade de reduzir inflamação, auxiliar a cicatrização e epitelização, possuindo propriedades antimicrobianas e antivirais, além de baixa imunogenicidade. As indicações de seu uso na oftalmologia têm aumentado muito nas duas últimas décadas. Objetivo: Descrever a estrutura básica e as propriedades biológicas da MA em relação aos componentes da sua matriz extracelular e fatores de crescimento, as consequências de diferentes técnicas empregadas na sua preservação e esterilização, métodos para remoção do epitélio e a comparação dos custos dos diferentes meios de conservação atualmente empregados. Métodos: Pesquisa nas bases de dados do Portal da Biblioteca Virtual em Saúde (BVS), Pubmed, Cochrane, Scielo e Lilacs com as palavras-chave: membrana amniótica, transplante, reconstrução da córnea, doenças da conjuntiva. Resultados: A literatura é vasta na descrição dos efeitos de diversos agentes e técnicas na preparação da MA, dentre elas sua preservação, esterilização e desepitelização. A membrana desnuda tem sido a escolha para a reconstrução da superfície ocular, pois facilita a cicatrização. Em relação aos agentes conservantes, o glicerol é o meio mais utilizado mundialmente pelo baixo custo e facilidade de manuseio. Conclusão: A comparação das diversas técnicas nos guia na elaboração de protocolos de preparo da MA para uso oftalmológico. A membrana desnuda facilita a cicatrização em relação a com células epiteliais. O glicerol é o meio de conservação mais utilizado pelo baixo custo e facilidade de manuseio.

Abstract Currently, the amniotic membrane (AM) has obtained importance due to its ability to reduce inflammation, helping in the healing and epithelialization processes, having antimicrobial and antiviral properties and low immunogenicity. Its indications in ophthalmology have increased considerably in the past two decades. Objective: To describe the basic structure and biological properties of the AM, the components of the extracellular matrix and growth factors, the consequences of different techniques used in its preservation, and sterilization methods for the epithelium removal. To compare the costs of the different preservation solutions currently employed. Study design: literature review. Methods: Research in BVS databases, PubMed, Cochrane, Scielo and Lilacs with keywords: amniotic membrane transplantation, corneal reconstruction, conjunctival diseases. Results: The literature is vast in describing the effects of different agents and techniques used in the preparation of MA, including its preservation, sterilization and desepithelization. The naked membrane is the choice to reconstruct the ocular surface, as it facilitates the healing course. Regarding the preservatives, glycerol is the most used worldwide due its low cost and easy handling. Conclusion: Comparing different techniques guides us in developing a MA preparation protocol for ophthalmic use. The naked membrane facilitates the healing process compared with the presence of epithelial cells. The glycerol is the most used preservation method because of its low cost and easy handling.

Desarrollo de la Medicina Transfusional en el Instituto de Hematología e Inmunología en el período 1996-2010 / Development of the transfusion medicine in the Institute of Hematology and Immunology during 1996-2010

El desarrollo de la Medicina Transfusional en el Instituto de Hematología e Inmunología en los últimos 15 años, se ha caracterizado por el logro de resultados relevantes en aspectos metodológicos, técnico-investigativos y de desarrollo de los recursos humanos, como son: la actualización y distribución de procederes para bancos de sangre, servicios de transfusiones y de guías clínicas para el uso de los componentes de la sangre en todo el país; la implementación del sistema de gestión de la calidad y automatización en los bancos de sangre; la introducción de técnicas moleculares para el pesquisaje viral de donantes de sangre; la introducción de anticuerpos monoclonales hemoclasificadores de producción nacional; el desarrollo de investigaciones multicéntricas sobre aspectos socioculturales relacionados con la donación de sangre y el pesquisaje de agentes infecciosos en pacientes politransfundidos; la obtención y procesamiento de células madre hematopoyéticas de sangre periférica para trasplante y medicina regenerativa, así como el desarrollo de la hemovigilancia. Las proyecciones de trabajo deberán estar encaminadas a la creación de un banco de células progenitoras de cordón umbilical para uso clínico, la obtención y producción nacional de concentrados de factores de la coagulación para uso terapéutico y el desarrollo de un programa nacional de hemovigilancia

The development of the Transfusion Medicine in the Institute of Hematology and Immunology in past 15 years, has been characterized by the achievement of relevant results in the methodological, technical-research and of the development or human resources features including: the updating and distribution of procedures for the blood banks; transfusion services and of clinical guidances for the use of blood components in all the country; the implementation of the quality management system and the blood banks automation, the introduction of molecular techniques for the viral screening of blood donors; the introduction of hemoclassifying monoclonal antibodies of national production, the development of multicenter researches on the sociocultural features related to blood donation and the screening of infectious agents in poly-transfused patients; the obtaining and processing of hematopoietic stem cells of peripheral blood for transplantation and regenerative medicine, as well as the development of the hemo-surveillance. The work projections must to be aimed to creation of a bank of progenitor cells from the umbilical cord to clinical use, the achievement and national production of coagulation factor concentrates to therapeutic use, and the development of a national program of hemo-surveillance

Banco de tumores en Chile, su aporte a la investigación: resultados de un proyecto piloto / A pilot experience with a tumor bank

Background: Despite having the technical facilities and the knowledge, Chile did not have a tumor bank until recently. Aimn: To describe the results of the first three years of a tumor bank. Material and methods: All cases stored in a tumor bank from June 2004 tojune 2007 were included. Samples were frozen in isopentane, afterwards in liquid nitrogen and finally transferred to freezers at -80°C. Quality controls with DNA and RNA extraction and immunohistochemistry, were per formed. Results: In the study period, 1239 cases were collected and 79 percent were malignant tumors. In 78 percent of cases, samples from the tumor and of normal neighaboring tissue, were stored. Twenty six percent of samples were from breast cáncer and 22 percent for digestive tumors. Immunohistochemical expression ofvimentin was measured in 30 cases and the expression of Ki67 an p53 in 20 cases. Thirteen of 15 breast cáncer samples had expression of estrogen receptors. In 30 cases, DNA and RNA extraction was carried out, amplifying B-globin and B-actin. Moreover RNA was extracted from 63 gastríc cáncer, 30 colon cáncer and gallbladder cáncer samples, for specific projects. Conclusions: The creation of a tumor bank is feasible, preserving samples of high biológical quality.

Avaliação de córneas doadoras em lâmpada de fenda e microscopia especular durante o período de armazenamento / Evaluation of corneal tissue by slit lamp and specular microscopy during the preservation period

OBJETIVO: Analisar as mudanças de notas de avaliação por meio da biomicroscopia e microscopia eletrônica de córneas doadas, e desta forma assegurar córnea doadora de padrão satisfatório ao paciente. MÉTODOS: Foram avaliadas prospectivamente 203 córneas entre setembro de 2002 e fevereiro de 2003, doadas ao Banco de Olhos de Sorocaba. A avaliação constava de graduação de 0 a 3 que variava mediante os seguintes fatores: exposição e defeito epitelial, opacidade e infiltrado estromal, dobras ou estrias de Descemet, pleomorfismo, polimegatismo e guttata, "endothelial snail track", edema, refletividade. Os dados encontrados foram correlacionados com o intervalo entre óbito e preservação, contagem de células endoteliais e idade dos doadores. RESULTADOS: Duzentos e três córneas foram avaliadas. A idade média dos doadores foi de 55 anos (dp=14,8 anos). O tempo médio do óbito à preservação foi de 9,1 h (mínimo de 2 horas e máximo de 25 horas). Oitenta e seis córneas sofreram pioras de avaliação, sendo que 66,3 por cento delas tinham até 2.500 células endoteliais e 59,3 por cento delas tinham tempo superior a 6 horas entre o óbito e a preservação. O dia da mudança teve por mediana 5. CONCLUSÕES: Córneas de doadores mais jovens possuem significativamente avaliações melhores que doadores mais velhos. O tempo médio de mudança de avaliação foi com 5 dias em 50 por cento das córneas, entretanto, expressiva parcela de córneas apresentou alteração nos dias 6°, 7° e 8°. Córneas preservadas após 6 horas do óbito têm maior tendência à perda de células e redução dos índices de avaliação.

PURPOSE: To analyze changes evaluation of corneal grafts by slit lamp and electron microscopy examination in order to ensure a donor cornea of good quality level for the patient. METHODS: 203 córneas donated to the Sorocaba Eye Bank between September 2002 and February 2003 were prospectively evaluated. The evaluation was graded from 0 to 3 according to the following factors: exposure and epithelial damage, stromal opacity, Descemet folds, pleomorphism, polymegatism and guttata, endothelial snail track, edema, reflectivity. The data were correlated with time between death and preservation, endothelial cell count and donor's age. RESULTS: 203 corneas were evaluated. The mean age of donors was 55 years (dp= 14.8 years). The mean time between death and preservation was 9.1 h (minimum of 2 h and maximum of 25 h). Eighty-six corneas suffered worsening of evaluation, whereby 66.3 percent had less than 2,500 endothelial cell count and 59.3 percent presented time between death and preservation over 6 hours. The mean day of the grading change was the 5th. CONCLUSIONS: Corneal grafts from younger donors had significantly better evaluation than those of older donors. The mean time of the evaluation change was on the 5th day in 50 percent of the corneas, however, an expressive number of corneas suffered changes on the 6th, 7th and 8th day. Corneal graft preserved after 6 hours of death had a greater tendency to lower cell count and to decrease in evaluation grades.

Controle microbiológico em valvas cardíacas humanas / Microbiologyc control in human heart valves

OBJETIVO: Avaliar, sob o aspecto microbiológico, valvas processadas pelo Banco de Valvas Cardíacas Humanas da Irmandade da Santa Casa de Misericórdia de Curitiba, para serem utilizadas em cirurgias cardiovasculares. MÉTODOS: Foi avaliado o processamento de 1.671 valvas, no período de junho de 1999 a junho de 2004. Das valvas e soluções envolvidas no processo foram coletadas amostras e semeadas nos meios de cultura: meio líquido tioglicolato, caldo soja tripticaseína e caldo Sabouraud, com quatorze dias de incubação, utilizando a metodologia modificada baseada na Farmacopéia Brasileira 1998 e USP 1990 (United States Pharmacopeia). Nas amostras que apresentaram crescimento foram realizadas as identificações microbianas. RESULTADOS: Em um total de 1.671 amostras analisadas, 92 por cento foram consideradas próprias para utilização, sob o aspecto microbiológico, uma vez que não apresentaram contaminação microbiana. Somente 8 por cento não foram liberadas para uso clínico por motivo de contaminação em alguma etapa do processamento da valva. CONCLUSÃO: Analisando os resultados, observou-se a importância do controle microbiológico em enxertos humanos, evitando a utilização de valvas com contaminação microbiológica em pacientes submetidos à cirurgia cardiovascular.

OBJECTIVE: To evaluate, from microbiological point of view, the valves processed by Human Heart Valve Bank of Santa Casa de Misericórdia of Curitiba for use in cardiovascular surgeries. METHODS: The processing of 1,671 valves, accomplished within the period of time between July 1999 and June 2004, was evaluated. Out of the valves and the solutions involved in the process, samples were collected and spread in culture mediums, such as fluid thioglycollate medium, tryptic soy broth and Sabouraud broth, for incubation during 14 days, using a modified methodology based on the Farmacopéia Brasileira 1988 (Brazilian Pharmacopeia) and USP 1990 (United States Pharmacopeia). The samples in which growing was observed were submitted to microbian identification. RESULTS: In a set of 1,671 samples, 92 percent were considered proper for use under microbiological point of view, since they did not display microbian contamination. The remaining 8 percent were rejected for clinical use because of contamination in some stage of the valve processing. CONCLUSION: From the Analysis of the results, it was observed the importance of microbiological control in human grafts, in order to avoid using microbiologically contaminated valves in patients submitted to cardiovascular surgery.

Organización y funcionamiento del primer banco de piel en Argentina, oficialmente autorizado / Organize and function skin banks officially authorized in Argentina

Desde principios de este siglo aparecen en la bibliografía internacional publicaciones relacionadas con la conservación de piel para su empleo como homoinjertos en el tratamiento de las quemaduras graves. A partir de la década del 50 se encuentran datos referidos a la posibilidad de organizar bancos para el almacenamiento de piel. A partir de 1980 se elaboran protocolos detallados para el procesamiento, almacenaje y ulterior empleo de la piel conservada. En nuestro país, la Fundación del Quemado Fortunato Benaim ha podido concretar la instalación de un Banco de Piel que se ajusta a los requisitos internacionales y es el primero oficialmente autorizado en la Argentina por el INCUCAI, de acuerdo con las disposiciones emanadas de la Ley de Ablación de Implante de Organos y Tejidos

Derechos humanos y trasplantes de organos / Human riglets and organs transplants

La Comisión Nacional de Derechos Humanos ha incluido en su programa de publicaciones este documento, intitulado derechos humanos y trasplantes de órganos, con el propósito de que el estudioso de los derechos del hombre reconozca que, ciertamente, hay evidencias científicas en los más diversos campos que confirman día tras día la explicación biológica de estas extraordinarias tecnologías y su pertinencia. El documento está dividido en los siguientes apartados: 1.- Sociedad, trasplante y tecnología. El futuro del trasplante frente a la tecnología 2.- Aspectos ético-legales de los trasplantes en México 3.- Factores económicos y trasplantes de órganos 4.- En torno a la discriminación 5.- Trasplantes de tejido embrionario al cerebro humano 6.- El avance científico y el humanismo

Banco de tejidos / Tissue bank

Los bancos de tejidos representan uno de los horizontes mas amplios de la ortopedia actual. El inicio logico de estos debe ser el proceso y almacenamiento de hueso por ser esta tecnica la mas util y a su vez la mas simple. En el Hospital Universitario del Valle iniciamos el banco de tejidos en Octubre de 1985, logrando realizarse el primer trasplante en Diciembre de 1986, habiedose beneficiado hasta el momento un total de treinta pacientes. En este trabajo revisamos los aspectos basicos del trasplante de huesos, terminologia, histologia, tecnicas y finalmente presentamos la tecnica que veniamos empleando para el proceso de huesos y tejidos donados a nuestro banco.